摘要: 畜禽副产物的开发利用与现代生物科技紧密结合，具有科技含量高、附加值高等特点。肝脏为猪屠宰后的主要副产品之一，约占猪体重的1.4%。猪肝的营养成分及其丰富，每百克猪肝含蛋白质21.3克，是猪肉的两倍，含脂肪4.5克，碳水化合物1.4克，并含有多种... 展开 畜禽副产物的开发利用与现代生物科技紧密结合，具有科技含量高、附加值高等特点。肝脏为猪屠宰后的主要副产品之一，约占猪体重的1.4%。猪肝的营养成分及其丰富，每百克猪肝含蛋白质21.3克，是猪肉的两倍，含脂肪4.5克，碳水化合物1.4克，并含有多种维生素和矿物质元素。但肝中脂肪熔点低(26-34℃)，在加工过程中极易熔化、流失和氧化，造成原料利用率低、成品率低，营养损失严重等系列问题。此外，肝脏是代谢中心站和解毒器官，又是胆固醇含量较高的部位，故人们在直接食用时，也会有所顾虑。因此，如何开发猪肝新产品，提高猪肝的附加值，引起了人们极大关注。 磷脂是动物细胞膜的重要组分之一，具有广泛的生理活性。研究表明，动物肝脏中磷脂丰富，猪肝中磷脂含量为3.3.3.4%。同时，在哺乳动物肝脏中，除了CDP.胆碱通路外，还存在一条肝脏特有的PC合成通路--PEMT通路。而且，相较于植物源卵磷脂，动物肝脏中磷脂不饱和脂肪酸含量更高，并含有一些特有的功能分子。目前，国内外对磷脂的研究和开发多集中于大豆，对动物性的肝脏磷脂的研究报道还不多见。因此，猪肝磷脂产品的开发及产业化研究具有重要的意义。 本文首先选用经典的Folch法，以实验室前期研究结果为基础，建立了分离制备猪肝磷脂的简易方法，并初步优化和放大了提取的工艺条件。其次，利用食品储存期加速测试法(ASLT)和高效液相色谱(HPLC)法等对猪肝磷脂的理化性质、稳定性和安全性做了研究。然后，以小鼠为研究对象进行了猪肝磷脂生物学功能实验，包括：(1)行为学实验，如跳台实验、旷场实验(2)抗氧化功能实验(3)骨骼肌细胞膜流动性实验(4)酒精损伤实验(5)窖蛋白-1(Cav-1)和蛋白激酶C(PKCa)蛋白表达实验。通过猪肝磷脂综合利用的初步研究，旨在为开发磷脂制剂保健品提供一定的实验依据。 结果： 1、猪肝磷脂主要成分包括：心磷脂(CL)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇/磷脂酰丝氨酸(PI/PS)、磷脂酰胆碱(PC)和鞘磷脂(SM)。其中，PC为主要成份，达58.3%，PE、CL、SM、PI、PS含量分别为25%、8.5%、5.6%、2.6%。 2、以250g猪肝为标准，氯仿：甲醇=2:1为最优比例，剂量为800ml和400ml时最佳。萃取温度选择4℃和20℃均可，萃取时间2h为宜。丙酮萃取比例为总脂和丙酮的质量体积比3：1时为宜。 3、250g猪肝可提取出1.6g肝磷脂物质，占总肝磷脂的66%。猪肝磷脂为白色、无味、常温为固体颗粒、熔点53℃、密度0.91g/cm3。 4、大豆磷脂的稳定性高于猪肝磷脂；添加维生素E可延长猪肝磷脂的保存期。经HPLC法检测提取物磷脂，未检测出磺胺类药物残留。 5、生物学功能检测表明： (1)猪肝磷脂可以明显提高小鼠学习记忆能力和空间探索能力，表现在小鼠逃避潜伏期(EL)和下台累积错误次数(M)减少、中央格停留时间降低、站立次数增加； (2)猪肝磷脂可以显著增强小鼠骨骼肌细胞抗氧化能力，表现在细胞的丙二醛(MDA)含量下降、超氧化物歧化酶(SOD)含量升高、Na+-K+-ATP酶活性升高，膜的流动性增强； (3)猪肝磷脂具有对酒精肝损伤的保护作用，使小鼠肝细胞谷草转氨酶(AST)含量降低、MDA含量降低、还原型谷胱甘肽(GSH)活性升高，同时发现，肝磷脂可以明显促进小鼠肝细胞内Cav-1蛋白和：PKCa蛋白的表达。 结论： 1、经过猪肝磷脂提取工艺的优化，肝磷脂得率较高，为66%，且安全性高。 2、猪肝磷脂有利于提高小鼠的学习能力、记忆能力、探索能力、抗氧化能力以及增加细胞膜的流动性。 3、猪肝磷脂可以促进小鼠肝细胞Cav-1蛋白和PKCa蛋白的表达，从而保护酒精对肝脏的损伤。 收起