摘要: 微栓塞是冠状动脉无复流的主要原因，是急性冠脉综合征(ACS)及经皮冠状动脉介入治疗(PCI)中十分常见且重要的临床病理过程[1]，减少冠状动脉微栓塞(CME)的发生以及改善CME引起的心肌细胞损伤具有重要的临床意义。为此，我们利用大鼠自体微栓塞模型，通... 展开 微栓塞是冠状动脉无复流的主要原因，是急性冠脉综合征(ACS)及经皮冠状动脉介入治疗(PCI)中十分常见且重要的临床病理过程[1]，减少冠状动脉微栓塞(CME)的发生以及改善CME引起的心肌细胞损伤具有重要的临床意义。为此，我们利用大鼠自体微栓塞模型，通过CME后心肌细胞凋亡调控基因、凋亡执行蛋白表达的改变以及血流动力学检测，探讨(1)CME对心肌细胞凋亡及左心室功能的影响。(2)粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对冠脉微栓塞心肌细胞凋亡的影响及其细胞内信号传导机制。 一、冠状动脉微栓塞对心肌细胞凋亡及左心室功能的影响目的：探讨冠脉微栓塞对大鼠心肌细胞凋亡及左心室功能的影响。方法：采用清洁级健康雄性SD大鼠56只，体重280～320g。随机分为假手术组(Sham组n=24)和微栓塞组(CME组n=32)；根据不同观察时间点再分为术后3d(天)、7d、14d及28d四个亚组，每亚组6-8只。CME组夹闭升主动脉同时自左室腔注入自体微血栓混悬液，Sham组则注入等容量的生理盐水。采用HE及Masson染色观察心肌组织病理学改变；Real-time PCR及免疫组化检测心肌细胞Bcl-2、Bax、Fas、Fas-L等凋亡调控基因mRNA及其蛋白的表达；采用Western blot方法检测Caspase3、Caspase9和裂解PARP蛋白的表达；应用超声心动图及有创血液动力学检测大鼠左心功能的变化。 结果：(1)HE染色显示CME术后可见心内膜下多中心小灶性心肌缺血、坏死伴白细胞浸润。Masson染色显示CME后心肌微小纤维灶形成，且多分布于心内膜区。(2)与Sham组相比较，CME组术后Bax、Fas及Fas-L mRNA及其蛋白的表达水平明显增高，Bc1-2/Bax的比值明显降低(7d：0.18±0.04 vs 2.98±0.49)，术后7d达高峰(P<0.01)。(3)CME组Caspase-3、Caspase-9及裂解PARP蛋白表达明显高于Sham组，同样在术后7d达高峰(P<0.01)。(4)CME组凋亡指数较Sham组明显增高(7d：17.2±1.9 vs 1.2±0.6)(P<0.01)；LVEF、LVSP及±dp/dtmax较sham组明显降低(P<0.01)。结论：冠脉微栓塞早期即可通过改变凋亡调控基因的平衡，启动、激活Caspase级联反应，促进心肌细胞凋亡，降低左室功能。 收起