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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 目的:观察组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase6,HDAC6)上调表达对胃癌SGC-7901细胞株的增殖以及常规化疗药诱导其凋亡的影响,并初步探讨以HDAC6为靶点治疗胃癌的可行性。 方法:培养胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823,免疫细胞化学法检测HDAC6的... 展开 目的:观察组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase6,HDAC6)上调表达对胃癌SGC-7901细胞株的增殖以及常规化疗药诱导其凋亡的影响,并初步探讨以HDAC6为靶点治疗胃癌的可行性。 方法:培养胃癌细胞株SGC-7901、BGC-823,免疫细胞化学法检测HDAC6的表达,选择表达相对高的细胞株进行实验;HDAC6真核表达载体pCDNA3.1-HDAC6-FLAG用脂质体转染法转染胃癌细胞株SGC-7901,G418筛选阳性克隆;采用Western blot从蛋白水平检测转染细胞HDAC6的表达;细胞生长曲线(MTT法)测定和集落形成试验检测转染细胞的增殖情况;流式细胞仪检测转染细胞对常规化疗药诱导的凋亡的敏感性。 结果:(1)免疫细胞化学检测显示SGC-7901、BGC-823细胞的胞浆均可见HDAC6表达,但表达水平SGC-7901明显高于BGC-823(0.28±0.07 VS 0.19±0.04,P<0.05).(2)Western blot检测显示,转染了pCDNA3.1-HDAC6-FLAG的SGC-7901细胞HDAC6蛋白表达水平明显高于非转染组及空载体组(3591.52±2 37.65 vs 1 899.9 3±1 33.4 3、1685.59±1 76.70,P<0.05). (3)细胞生长曲线测定和集落形成试验均提示转染细胞增殖能力较未转染组和空载体组明显增强(P<0.05)。 (4)流式细胞仪检测显示转染组细胞可抑制常规化疗药所诱导的细胞凋亡,其凋亡率明显低于未转染组和空载体组[(10.46±0.65)%vs(2 0.59±0.88)%、(22.31±1.40)%,P<0.05]。结论:HDAC6在胃癌细胞中呈阳性表达,并可增强胃癌细胞SGC-7901的增殖能力,促进肿瘤生长,降低胃癌细胞对化疗药物的敏感性。由此我们可以推知抑制HDAC6的表达可抑制胃癌细胞增殖,增强化疗药物的敏感性,HDAC6可以作为胃癌治疗的新靶点。 收起
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