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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 第一部分结核杆菌ESAT-6抗原多表位DNA疫苗的构建与体外表达的鉴定目的：构建含3个结核杆菌ESAT-6抗原T细胞表位及Flt3配体基因的重组质粒，并使其在大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中表达。方法：用计算机软件预测结核杆菌ESAT-6抗原的T细胞表位谱，选取3个... 展开 第一部分结核杆菌ESAT-6抗原多表位DNA疫苗的构建与体外表达的鉴定目的：构建含3个结核杆菌ESAT-6抗原T细胞表位及Flt3配体基因的重组质粒，并使其在大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)中表达。方法：用计算机软件预测结核杆菌ESAT-6抗原的T细胞表位谱，选取3个T细胞表位，并以Ala-Ala-Tyr(AAY)序列作为接头，合成全基因序列，定向克隆人真核双表达载体pIRES及质粒pIRES-FL。在酶切分析与序列测定后，用PEI转染至GMCs细胞，并行Western blot鉴定其体外表达。结果：核酸序列测定证实重组质粒构建正确，Westem blot证实该重组质粒能在体外GMCs细胞中表达融合蛋白。结论：成功构建了结核杆菌ESAT-6抗原多表位基因重组质粒。 收起
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