摘要: 目的：研究缺血预处理可否通过上调凋亡抑制基因Bcl-2、下调凋亡促进基因Bax的表达而减少因凋亡引起的肝内外胆管的损伤，同时比较5分钟时限、10分钟时限缺血预处理后的Bcl-2/Bax比值是否有差别，并根据比值差异分析何种时限缺血预处理方式对抵抗胆管... 展开 目的：研究缺血预处理可否通过上调凋亡抑制基因Bcl-2、下调凋亡促进基因Bax的表达而减少因凋亡引起的肝内外胆管的损伤，同时比较5分钟时限、10分钟时限缺血预处理后的Bcl-2/Bax比值是否有差别，并根据比值差异分析何种时限缺血预处理方式对抵抗胆管缺血再灌注损伤更有利。 方法：健康雄性SD大鼠40只，按Chien CT等的方法建立肝脏原位缺血再灌注模型，分为四组：假手术组(SO)、直接缺血60分钟组(IR)、5分钟时限缺血预处理组(IP5)、10分钟时限缺血预处理组(IP10)。术后24小时腹主动脉采血测定生化指标，取肝左叶组织分别用免疫组化染色及原位杂交染色的方法测定其中Bcl-2、Bax蛋白及其基因。并对肝脏标本进行TUNEL染色识别典型凋亡细胞计算凋亡指数AI。所得数据以均数士标准差(x±s)表示，组间比较采用单因素方差分析和SNK法进行两两比较，以P<0.05为有统计学差异；IP组间以P<0.10为有统计学意义。 结果：SO组、IR组及IP各组模型建立成功，假手术组发生凋亡的胆管上皮细胞少，IR组凋亡的胆管上皮细胞增多，IP组发生凋亡的胆管上皮细胞数相对于IR组又减少(P<0.05)。胆管上皮细胞凋亡抑制基因Bcl-2的mRNA和蛋白的表达在假手术组表达较低，在IR及IP各组表达均增高，其中IR组表达较IP组表达降低，同时IP组间以5分钟时限IP组较10分钟IP组Bcl-2的mRNA和蛋白表达略高P<0.10)，故认为缺血预处理时限以5分钟为宜、且5分钟缺血预处理过程即可得到满意效果；凋亡促进基因Bax的mRNA和蛋白的表达在假手术组表达低(P<0.05)，而在IR及IP各组表达虽有差异但并无统计学意义(P>0.10)，这个结果提示IP可以上调凋亡抑制基因Bcl-2而发挥对胆管上皮的保护作用，而凋亡促进基因Bax表达与保护作用无直接关系。 结论： 1.肝脏缺血再灌注引发胆管上皮细胞凋亡。 2.常温下缺血预处理可以减轻肝脏缺血再灌注损伤中胆管损伤。 3.缺血预处理对胆管上皮细胞的保护作用可能与激活上调胆管上皮细胞凋亡抑制基因Bcl-2的表达有关，而Bax表达与保护作用无直接关系。 4.5分钟时限缺血预处理方式对肝脏缺血再灌注保护作用最佳。 收起