摘要: 目的： 1.建立不同妊娠阶段小鼠子宫平滑肌中NMBR的基因及蛋白表达谱。 2.研究分娩前后妊娠小鼠子宫平滑肌组织中NF-κB的DNA结合活性、IL-6和HSP70的基因和蛋白的表达变化。 3.探讨NMBR-NF-κB-IL-6及HSP70的相关性及与分娩发动的关系。 方... 展开 目的： 1.建立不同妊娠阶段小鼠子宫平滑肌中NMBR的基因及蛋白表达谱。 2.研究分娩前后妊娠小鼠子宫平滑肌组织中NF-κB的DNA结合活性、IL-6和HSP70的基因和蛋白的表达变化。 3.探讨NMBR-NF-κB-IL-6及HSP70的相关性及与分娩发动的关系。 方法： 1.建立孕龄准确的孕鼠模型，将其分为未孕、早孕、中孕、晚孕、产时、产后六个妊娠阶段。 2.应用半定量RT-PCR和Western blot技术检测不同妊娠阶段小鼠子宫平滑肌中NMBR和分娩前后平滑肌组织中IL-6及HSP70的mRNA及蛋白表达水平。 3.利用NoShiR转录因子分析法检测分娩前后妊娠小鼠子宫平滑肌组织中NF-κB-P65的DNA结合活性。 结果： 1.子宫平滑肌中NMBR的基因及蛋白表达谱1)NMBR在未孕、早孕、中孕、晚孕、产时及产后六组的mRNA相对表达量依次为0.09±0.23、0.07±0.16、0.36±0.29、0.17±0.28、0.56±0.35、0.09±0.18。产时组的表达高于其它各组，产时与未孕、早孕、晚孕、产后组比较差异有显著意义(P<0.05)；产时虽高于中孕，但二者比较差异无显著性(P>0.05)。 2)NMBR在上述六组中的蛋白相对表达量依次为0、0.04±0.10、0.25±0.26、0.33±0.28、0.68±0.41、0。产时组表达显著高于其它各组(P<0.01)。 2.分娩前后妊娠小鼠子宫平滑肌组织中NF-κB-P65的DNA结合活性。 P65在未孕、晚孕、产时、产后组的DNA相对结合活性依次为0.17±0.09、0.16±0.03、0.24±0.04、0.19±0.03，产时组显著高于其他各组(P<0.05)。 3.分娩前后子宫平滑肌组织中IL-6mRNA、蛋白表达1)IL-6在未孕、晚孕、产时、产后各组的mRNA相对表达量依次为0.49±0.25、0.39±0.14、0.96±0.40、0.66±0.21，产时组表达显著高于其他各组(P<0.05)。 2)IL-6在上述各组中的蛋白相对表达量为0、0.15±0.16、0.11±0.15、0，晚孕和产时组显著高于未孕和产后(P<0.05)，但产时与晚孕组比较无显著性差异(P>0.05)。 4.分娩前后子宫平滑肌组织中HPS70的mRNA及蛋白表达1)HSP70在未孕、晚孕、产时、产后各组的mRNA相对表达量依次为0.18±0.15、0.79±0.33、0.76±0.23、0.49±0.22。晚孕和产时组显著高于未孕和产后(P<0.05)，产时与晚孕组比较无显著性差异(P>0.05)。 2)HPS70在以上4组的蛋白相对表达量依次为0.78+0.01、0.26±0.02、0.53±0.06、0.51±0.03，产时与产后组比晚孕组表达均明显升高(P<0.05)，但产时与产后两组之间无差异显著性(P>O。05)。 5.分娩前后NMBR与NF-κB、IL-6及HSP70的相关性分析1)NMBR-NF-κB-IL-6的相关性分析①NMBR mRNA表达水平，P65的DNA结合活性与IL-6mRNA表达水平的相关性：P65的表达变化与NMBR的变化呈正相关(r=0.40，p<0.01)；IL-6变化亦与NMBR呈正相关，(r=0.30，P<0.05)；IL-6的变化与P65的变化也有明显的正相关(r=0.36，P<0.05)。再对三组变量进行偏相关分析得出：NMBR变化通过P65的变化影响了IL-6的变化，三者之间存在正相关。 ②NMBR蛋白表达水平，P65的DNA结合活性与IL-6蛋白表达水平的相关性：NMBR与P65变化无显著相关性(P>0.05)；IL-6与NMBR变化呈正相关(r=0.36，P<0.05)；P65与IL-6变化无相关性(P>0.05)。 2)NMBR-NF-κB-HSP70的相关性分析①NMBRmRNA表达水平，P65的DNA结合活性与HSP70mRNA表达水平的相关性：P65的变化与NMBR的表达变化呈正相关(r=0.40，P<0.01)；HSP70的变化与NMBR的变化呈正相关(r=0.49，P<0.01)；P65的变化与HSP70的变化无相关性(P>0.05)。 ②NMBR蛋白表达水平，P65的DNA结合活性与HSP70蛋白表达水平的相关性：NMBR-P65-HSP70变化之间均无相关性(P>0.05)。 结论： 1.NMBR的mRNA和蛋白表达随妊娠进展呈升高趋势，在分娩时达到最高峰，分娩后迅速降低，提示产时高表达NMBR可能参与子宫平滑肌收缩。 2.NF-κB介导的NMBR信号转导通过IL-6参与的炎症反应可能是子宫分娩发动的重要途径之一。 3.NMBR可能通过影响HSP70表达参与分娩发动，其调节可能不依赖于NF-κB-P65途径。 收起