摘要: 长穗桑(MoruswittiorumHandel-Mazzetti)，是桑科(Moraceae)桑属(Morus)植物。该桑种的桑椹大且味甜，可作为果用桑，因树形高大，还可作为木材用桑。 果桑的果实既桑椹，桑椹具营养丰富、防病治病和延缓衰老等功能特点，在食品和药品上的应用极为... 展开 长穗桑(MoruswittiorumHandel-Mazzetti)，是桑科(Moraceae)桑属(Morus)植物。该桑种的桑椹大且味甜，可作为果用桑，因树形高大，还可作为木材用桑。 果桑的果实既桑椹，桑椹具营养丰富、防病治病和延缓衰老等功能特点，在食品和药品上的应用极为广泛。特别是桑果中含有一种叫“白黎芦醇”(RES)的物质，能刺激人体内某些基因抑制癌细胞生长，并能阻止血液细胞中栓塞的形成。另外，桑椹还可以阻止致癌物质引起的细胞突变。因此，无论是传统医学还是现代医学都视桑椹为防病保健之佳品。1993国家卫生部把桑椹列为“既是食品又是药品”的农产品之一。据专家预测，桑果将成为第三代水果中的精品，二十一世纪初在全球将掀起食用桑椹热。 目前，果用桑栽培品种以二倍体为主，也有一定数量的三倍体，天然四倍体种质很罕见。由于生产上应用的三倍体桑大多具有优质、高产、桑果个大、无核、肉厚等优良性状，而要培育三倍体，首先要获得四倍体。所以，本试验采用多倍体育种技术和杂交育种相结合的方法，诱导培育长穗桑四倍体新种质资源，提供果用桑新种质，以期从中选育出更多类型的产量高品质好的新品种。 本研究以长穗桑(MoruswittiorumHandel-Mazzetti)二倍体为试验材料，利用组织培养技术结合秋水仙素化学诱导法，对培育长穗桑四倍体新种质的技术和方法进行了研究，并得到了长穗桑四倍体植株，为果用桑多倍体育种打下基础。 主要试验结果如下：对长穗桑的离体再生体系培养条件的探索结果表明：对长穗桑适宜的消毒方式是，洗涤剂浸泡10min，自来水冲洗30min，75％乙醇处理40s，0.1％升汞消毒12min(升汞中加1～2滴2％吐温-20)，无菌水洗4～6次。可以获得90％的芽诱导率，污染率也仅为10％，出芽所需时间为20～27d。长穗桑适宜的增殖培养基为MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+蔗糖30g/L，其最高的增殖率为320％。适合长穗桑生根的培养基为1/2MS+BA0.1mg/L+NAA0.05mg/L+30g/L蔗糖，30d统计时，最大生根率为97.4％，平均每植株6.2条根。 在建立离体再生体系的基础上，利用秋水仙素溶液对长穗桑进行四倍体诱导，诱导方法采用了浸泡法和混培法，混培法又分为在固体培养基中加入秋水仙素和在液体培养基中加入秋水仙素两种方式。结果表明：以浸泡法的诱导率最高，为26.7％，其处理条件为0.2％浓度的秋水仙素浸泡茎段3d，秋水仙素掺入液体培养基的诱导率为20.0％，秋水仙素掺入固体培养基的诱导率最低，为13.3％。三种方法的最佳诱导浓度均为0.2％。 对获得的长穗桑四倍体与二倍体进行外部形态和细胞学的比较观察，结果表明：四倍体植株的叶片的长度、宽度和厚度均大于二倍体，三项指标分别为二倍体的131.7％、144.7％、161.9％。四倍体植株与二倍体的气孔特性的分析比较，结果表明：四倍体的保卫细胞内叶绿体数目明显多于二倍体，约为二倍体的208.8％，保卫细胞明显增大，长度和宽度均大于二倍体，分别为二倍体的148.3％、149.5％。气孔大小较二倍体明显增大，长度为二倍体的125.8％、宽度为二倍体的138.2％，而密度下降，为二倍体的60.9％。叶片厚度、气孔密度、保卫细胞内叶绿体数目经方差分析，均达到了极显著差异。表明叶片厚度、气孔密度、保卫细胞内叶绿体数目是鉴别二倍体和四倍体的重要性状。 对获得的长穗桑四倍体与二倍体进行抗寒性与耐热性的比较研究，内容包括：40℃和0℃逆境胁迫后，测定二倍体和四倍体电导率和过氧化氢酶活性的变化。结果表明：在经过40℃和0℃逆境胁迫后，长穗桑四倍体的电导率均显著低于二倍体。在40℃温度处理下，四倍体的电导率平均值为62.53μS·cm-1，而二倍体的为91.83μS·cm-1，在0℃温度处理下，四倍体的电导率平均值为60.10μS·cm-1，二倍体的为99.06μS·cm-1，并且四倍体和二倍体的差异达到极显著水平。过氧化氢酶活性的测定结果也表明：经过40℃和0℃逆境胁迫后，四倍体的过氧化氢酶活性均高于二倍体，并且差异达到显著水平。这两个指标的测定结果也表明，四倍体对于高温(40℃)和低温(0℃)的胁迫，其耐热性与抗寒性要显著强于二倍体，其植株对温度适应性更强。 收起