摘要: 枯草芽孢杆菌B68是从海南儋州市香蕉园中筛选获得的一株拮抗细菌。该菌株对香蕉冠腐病有较强的抑制效果，其无菌滤液还能抑制香蕉冠腐病病菌孢子的萌发，融解菌丝细胞壁，具有开发成抗真菌农业抗生素的广阔前景。鉴于该菌株是野生型菌株，一般发酵效价... 展开 枯草芽孢杆菌B68是从海南儋州市香蕉园中筛选获得的一株拮抗细菌。该菌株对香蕉冠腐病有较强的抑制效果，其无菌滤液还能抑制香蕉冠腐病病菌孢子的萌发，融解菌丝细胞壁，具有开发成抗真菌农业抗生素的广阔前景。鉴于该菌株是野生型菌株，一般发酵效价低，还不能满足工业化开发的要求。本文首先对该菌株的发酵条件进行了研究，然后又以该菌株为出发菌株，以香蕉冠腐病镰刀菌F4为指示菌株，采用物理和化学方法对该菌株进行了诱变育种，其结果如下：1.枯草芽孢杆菌B68的发酵条件：在所选的16种培养基中最适合枯草芽孢杆菌B68的是6号培养基(配方是葡萄糖40g，蛋白胨l0g，酵母膏10g，蒸馏水1000mL)，其培养滤液对香蕉冠腐病菌半裸镰刀菌F4菌丝的抑菌率为77.12％，孢子萌发率仅为0.33％。基本营养物质的初步筛选实验证明最适合的碳源是葡萄糖，其次是蔗糖、可溶性淀粉；最适合的氮源是酵母膏，其次是蛋白胨。培养基初始pH值、振荡培养时间、菌龄、温度等对抗菌物质的分泌有一定的影响。结果表明初始pH值7.0、菌龄为3d、28℃振荡培养48h，为菌株的最佳发酵条件。 2.不同的物理和化学诱变剂处理B68菌株的结果表明，不同的诱变剂对该菌株有着不同的致死效应。通过诱变育种，利用平板对峙培养的初筛方法，共获得了28株高效突变株。 3.通过对初筛得到的28株菌株进行摇瓶发酵实验，获得12株优良菌株。其中紫外线诱变获得3株，U-28、U-43和U-116，它们的抑菌效果比原始菌株B68提高了3.55％，4.37％，3.64％；硫酸二乙酯诱变也获得了3株突变株，D-24、D-26、D-87，它们的抑菌效果比原始菌株B68提高了4.22％，5.90％，3.83％。紫外线和硫酸二乙酯复合诱变最终获得2株突变株，UD-7，UD-93，它们的抑菌效果比原始菌株B68提高了2.27％，2.86％。亚硝基胍诱变获得4株突变株，N-3，N-36，N-52，N-112，抑菌效果比原始菌株B68分别提高了5.69％，4.39％，5.32％，3.22％。 4.把复筛后抑菌效果较好的菌株共12株进行传代实验，结果表明诱变株比原始菌株B68更能稳定地遗传。 收起