摘要: 日本落叶松(Larix kaempferi (Lamb．)Carr．)为松科(Pinaceae)落叶松属(Larix Mill)植物，它具有生长快、产量高、材质好等优点，其木材可供建筑、造纸等用材，目前在我国东北及日本等山区已成为重要用材造林树种，是值得大力推广的优良树种。开展体... 展开 日本落叶松(Larix kaempferi (Lamb．)Carr．)为松科(Pinaceae)落叶松属(Larix Mill)植物，它具有生长快、产量高、材质好等优点，其木材可供建筑、造纸等用材，目前在我国东北及日本等山区已成为重要用材造林树种，是值得大力推广的优良树种。开展体细胞胚胎发生的研究，对体细胞胚胎发育的机理和快速繁育等研究都具有重要的理论意义与实践价值。以日本落叶松树种不同基因型的未成熟合子胚为外植体，对不同基因型、基本培养基，2，4-D的浓度等，进行了愈伤组织诱导能力的比较；研究了ABA对日本落叶松胚性愈伤组织的体细胞胚成熟的影响，在不同ABA浓度下产生的Ⅰ和Ⅱ期不同发育阶段的体细胞胚萌发和植株再生能力进行比较；对体细胞胚不同发育过程进行了组织结构，以及成熟胚中淀粉和蛋白质的组织化学的观测；对日本落叶松的胚性愈伤组织进行了组成成分和全蛋白质的双向电泳，以及图谱的分析。主要得到如下结果： 1)进行了日本落叶松愈伤组织的诱导和胚性愈伤组织的筛选，诱导出了体细胞胚并获得了再生植株。 2)ABA能促进松杉类植物体细胞胚分化、提高体细胞胚的发生频率，以及抑制早熟体细胞胚的发生，降低不正常体细胞胚的发生频率。 3)运用组织切片法对不同发育时期体细胞胚的结构进行了观察，结果表明，在体细胞胚的发育早期阶段具有明显的裂生多胚现象，但最终只有一个胚才能发育成熟，成熟的体细胞胚具有跟和合子胚一样的结构。 4)运用高碘酸-锡夫反应(PAS)对成熟胚中多糖的组织细胞定位显示，淀粉等多糖成分在成熟的体细胞胚中是非均匀分布的；运用考马斯亮蓝染色对成熟胚中的蛋白质的显微定位表明，成熟胚的细胞质中存在大量的蛋白质和大小不同的蛋白储存泡，在后者的膜上具有大量的膜蛋白。 5)获得了日本落叶松的胚性愈伤组织的蛋白质双向电泳图谱，运用ImageMaster 2D图像分析软件对电泳图谱分析表明：凝胶上展现出475个不同的蛋白质组分，并进一步确定了每个蛋白质相应的分子量、等电点和以及其相关性和每种蛋白的相对含量等。 综上所述，上述研究对进一步认识影响落叶松属植物体细胞胚胎发生和植株再生的因素，同时开展了体细胞胚发育胚性功能蛋白的研究，为愈伤组织的分化能力相关蛋白质的检测、分离和基因克隆等方面的研究奠定了基础。 收起