摘要: 黄花蒿是我国的传统中药。上世纪七十年代我国科技工作者首次从黄花蒿中分离出了抗疟单体一青蒿素，现在青蒿素作为抗疟特效药而倍受关注，同时对血吸虫病、艾滋病并发症等也有很好的疗效。从天然黄花蒿中提取青蒿素是目前获取天然青蒿素的唯一来源。... 展开 黄花蒿是我国的传统中药。上世纪七十年代我国科技工作者首次从黄花蒿中分离出了抗疟单体一青蒿素，现在青蒿素作为抗疟特效药而倍受关注，同时对血吸虫病、艾滋病并发症等也有很好的疗效。从天然黄花蒿中提取青蒿素是目前获取天然青蒿素的唯一来源。目前栽培的黄花蒿由野生黄花蒿直接引种，产量低，青蒿素含量低(<5‰左右)。遗传差异导致黄花蒿单株之间青蒿素含量差异很大。培育青蒿素含量高且稳定的黄花蒿栽培品种必将大大提高经济效益和耕地利用效率。本课题首先优化了青蒿素含量的测定方法，从而能更快速、简便、准确地测定其含量；再通过该优化方法对四川遂宁地区人工种植的黄花蒿青蒿素含量进行了测定，为黄花蒿的开发利用提供了依据。然后从分子水平上研究了不同青蒿素含量与黄花蒿遗传多态性的关系。主要研究结果如下： 1.青蒿素含量的优化测定方法：黄花蒿干叶粉1g，石油醚(30～60℃)20mL， 50℃超声波提取5min，共提取4次，合并浸提液。50℃减压浓缩成浸膏，用95％乙醇定容至50ml。吸取溶液10ml，再用0.2％NaOH溶液定容到50ml。50℃水浴30min，冷却至室温，用紫外-可见分光光度计测292nm吸收峰值。 2.按上述优化测定方法得到四川遂宁地区人工种植的黄花蒿单株样品的青蒿素平均含量为7.55％。左右，由此可认定该地区黄花蒿资源具有可开发利用的前景。单株青蒿素含量最低为5.05‰，最高为12.79‰，这说明人工种植的黄花蒿群体中存在很大的遗传变异，通过品种选育提高青蒿素生产效率具有巨大潜力。 3.用改良的CTAB法提取黄花蒿干叶DNA，效果良好，可以满足黄花蒿分子标记，这不仅对野外采集带来极大方便，还为从分子水平上鉴定高品质黄花蒿药材和原料的真伪提供了依据。 4.根据已克隆的倍半萜环化酶、紫穗槐二烯合酶、鲨烯合酶等关键酶设计引物，对四川遂宁地区不同青蒿素含量的黄花蒿单株样进行PCR扩增，获得了黄花蒿的两个青蒿素高含量性状候选标记，为实现黄花蒿分子育种的目标及利用植物基因工程改造中药材(提高产量和品质)进行有益的探索。 收起