摘要: 本文主要以胜利油田罗801区块的油井采出水为例,研究石油烃厌氧降解产甲烷过程中关键的功能微生物类群-产甲烷古菌.研究成果如下: 1.分离纯化8株氢营养型产甲烷古菌(编号:CC-1,CC-2,CC-3,ZC-2,ZC-3,ZC-4,ZC-5,ZC-6)和一株甲基营养型产甲烷古菌(ZC-... 展开 本文主要以胜利油田罗801区块的油井采出水为例,研究石油烃厌氧降解产甲烷过程中关键的功能微生物类群-产甲烷古菌.研究成果如下: 1.分离纯化8株氢营养型产甲烷古菌(编号:CC-1,CC-2,CC-3,ZC-2,ZC-3,ZC-4,ZC-5,ZC-6)和一株甲基营养型产甲烷古菌(ZC-1).16S rDNA序列系统发育学分析发现菌株CC-1与海沼甲烷球菌(Methanococcus maripaludis)相似性最高(100%);菌株CC-3与短小甲烷卵圆形菌(Methanocalculuspumilus)相似性最高(99%);菌株ZC-2,3,6之间的相似性都在99%以上,它们与棕榈油甲烷袋状菌(Methanoculleuspalmaeoli)的相似性最高(97.4-97.6%);菌株ZC-1与竹节状甲烷鬃毛菌(Methanosaeta harundinacea)相似性最高(90.6%).以MCR α亚基作为研究产甲烷古菌系统进化的分子指标发现菌株ZC-1与嗜热甲烷鬃毛菌(M.thermophila)的相似性最高(76.6%). 2.菌株ZC-1也是目前已知的生长温度最高(70℃)的甲基营养型产甲烷古菌,依据菌株ZC-1的生理生化和分子生物学特征把它命名为胜利甲烷嗜热微球菌新属新种(Methanothermomicrococcus shengliense gen.nov, sp.nov). 3.以油井采出水为接种物富集培养,获得了稳定的氢营养型和甲基营养型产甲烷古菌富集培养物,没有获得稳定的乙酸营养型产甲烷古菌富集培养物.以原油为唯一碳源富集培养,55℃富集培养半年后有甲烷产生,产生的甲烷碳同位素值接近传统观点认为的生物成因甲烷;原油饱和烃色谱图中有明显的"凸起",正构烷烃含量逐渐减少,不知名化合物峰升高,少数甚至超过正构烷烃的峰高;与好氧生物降解不同的是,长链正构烷烃先于短链的被降解;同样被厌氧微生物作用的原油,不同重复之间"凸起"现象不一致,表明即使在相同的降解时间内,厌氧微生物降解原油的效果也是存在差异的. 收起