摘要: 目的:利用体外软骨细胞培养体系,观察牛膝健步颗粒含药血清对人骨关节炎软骨细胞增殖与凋亡的影响,以探讨牛膝健步颗粒防治骨关节炎的作用。 方法:成年日本大耳白兔20只,体重2.5+-0.5kg,随机分为4组,分别给予牛膝健步颗粒(0.3g·ml-1、0.15g·ml-1、... 展开 目的:利用体外软骨细胞培养体系,观察牛膝健步颗粒含药血清对人骨关节炎软骨细胞增殖与凋亡的影响,以探讨牛膝健步颗粒防治骨关节炎的作用。 方法:成年日本大耳白兔20只,体重2.5+-0.5kg,随机分为4组,分别给予牛膝健步颗粒(0.3g·ml-1、0.15g·ml-1、0.075g·ml-1,生理盐水配制20ml)灌胃,空白血清组给予以生理盐水灌胃,连续7天,采血得含药血清和空白血清;从膝关节炎行关节置换术中获取离体膝关节软骨,进行软骨细胞分离培养;取第3代软骨细胞接种于6孔板及96孔培养板,培养待细胞贴壁后进行分组试验;6孔板上进行细胞形态学、免疫组织化学观察细胞形态培养;96孔培养板中分2组,分为正常对照组及OA组,采用MTT法检测细胞增殖,PI法流式细胞术分析细胞周期,Annexin V法流式细胞术分析细胞凋亡;另96孔培养板中分6组,每组5个复孔,分别为正常对照组,OA组,空白血清对照组,牛膝健步颗粒小、中、大剂量组,采用CCK-8法检测细胞增殖,Annexin V法流式细胞术分析细胞凋亡。 结果:OA软骨细胞凋亡率较正常软骨细胞相比显著增加(P＜0.01),而增殖速度显著比正常对照组缓慢(P＜0.01);牛膝健步颗粒大、中、小剂量含药血清对OA软骨细胞增殖均有明显的促进作用(P＜0.01),药物作用后,OA软骨细胞增殖较正常软骨细胞显著升高;牛膝健步颗粒含药血清小、中、大剂量均具有明显抑制OA软骨细胞早期凋亡的作用,但对晚期凋亡无明显抑制作用。 结论:牛膝健步颗粒含药血清可抑制OA软骨细胞过度凋亡、促进细胞增殖,这可能是牛膝健步颗粒抑制OA软骨破坏的重要机制之一. 收起