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国家工程技术图书馆
2022年11月29日
摘要: 本文为了研究克隆盘羊杀菌性/通透性增加蛋白基因,在巴斯德毕赤酵母中表达重组BPI蛋白,并检测重组BPI蛋白的抑菌活性，从盘羊外周血多形核粒细胞(PMN)中提取总RNA,经RT-PCR和RACE技术克隆盘羊BPI基因的cDNA全长,将其克隆至pPIC9K载体中,经PCR、酶切及... 展开 本文为了研究克隆盘羊杀菌性/通透性增加蛋白基因,在巴斯德毕赤酵母中表达重组BPI蛋白,并检测重组BPI蛋白的抑菌活性，从盘羊外周血多形核粒细胞(PMN)中提取总RNA,经RT-PCR和RACE技术克隆盘羊BPI基因的cDNA全长,将其克隆至pPIC9K载体中,经PCR、酶切及测序鉴定正确后,电转化至毕赤酵母GS115中并用甲醇进行诱导表达,通过微量肉汤稀释法检测重组BPI蛋白的抑菌活性.结果表明克隆的盘羊BPI基因cDNA序列全长1922bp,其中开放阅读框为1452bp,共编码483个氨基酸.SDS-PAGE检测结果表明重组BPI蛋白成功表达,抑菌试验表明表达的重组BPI蛋白具有明显的抑菌活性. 收起
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