摘要: 目的建立稳定分泌蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对分泌的单克隆抗体进行特异性鉴定,并将其用于建立竞争免疫酶联免疫吸附试验(c-ELISA)检测蓝舌病抗体的方法。方法 以纯化的BTV为抗原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0... 展开 目的建立稳定分泌蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)单克隆抗体的杂交瘤细胞株,对分泌的单克隆抗体进行特异性鉴定,并将其用于建立竞争免疫酶联免疫吸附试验(c-ELISA)检测蓝舌病抗体的方法。方法 以纯化的BTV为抗原免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,以大肠杆菌表达的VP7作为检测抗原,用间接ELISA法筛选杂交瘤细胞。纯化制备的单克隆抗体,以辣根过氧化物酶(HRP)进行标记,作为竞争抗体,Vp7作为包被抗原,组装c-ELISA蓝舌病抗体检测试剂盒,其对不同血清型绵羊抗血清进行了检测,并与美国进口试剂盒进行了比对。结果 成功筛选出8株稳定分泌BTV抗体的单克隆细胞瘤,组装了c-ELISA试剂盒,与进口试剂盒检测结果100﹪符合,与其它抗体无交叉反应,具有较高的特异性和敏感性。结论 成功研制出BTV单克隆抗体,选择了较好的实验条件,建立了竞争免疫酶联免疫吸附试验(c-ELISA)检测蓝舌病抗体的方法。 收起