摘要: 禽流感是目前影响世界养禽业的最严重的疫病之一.血凝素(HA)是禽流感病毒重要的结构蛋白,是诱导体液免疫的关键靶抗原.HA分为HA1和HA2两部分,各部分的抗原性和免疫原性也有差别,研究表明HA1的免疫原性和抗原性强于HA2. 本研究利用PCR技术亚克隆了... 展开 禽流感是目前影响世界养禽业的最严重的疫病之一.血凝素(HA)是禽流感病毒重要的结构蛋白,是诱导体液免疫的关键靶抗原.HA分为HA1和HA2两部分,各部分的抗原性和免疫原性也有差别,研究表明HA1的免疫原性和抗原性强于HA2. 本研究利用PCR技术亚克隆了H7亚型禽流感病毒的HA1基因,并将PCR产物连接到克隆载体pMD 18-T Simplevector,转化大肠杆菌.测序结果表明所克隆的片断大小为1035bp.将HA1基因克隆至原核表达载体pGEX-6P-1,经酶切和PCR鉴定,证明成功构建了重组表达载体pGEX-HA1.将构建好的融合表达载体在IPTG的诱导下在大肠杆菌中得到了表达.融合蛋白GST-HA1的分子量为63kD.Western-Blot和ELISA方法鉴定结果表明,融合蛋白与H7亚型禽流感阳性血清发生特异性反应,而与H5、H9亚型抗血清不发生反应. 收起