摘要: 目的:观察CADM1、IL-6、IL-8在肝郁型哮喘小鼠模型中的表达及柴朴汤干预的影响。 方法:选取30只清洁级体重(20±2g)雌性Balb/c小鼠，正常饲养1周，随机分为A-E共5组，各组6只。即正常组(A组)、哮喘组(B组)、肝郁哮喘组(C组)、肝郁哮喘+柴朴汤组(D组... 展开 目的:观察CADM1、IL-6、IL-8在肝郁型哮喘小鼠模型中的表达及柴朴汤干预的影响。 方法:选取30只清洁级体重(20±2g)雌性Balb/c小鼠，正常饲养1周，随机分为A-E共5组，各组6只。即正常组(A组)、哮喘组(B组)、肝郁哮喘组(C组)、肝郁哮喘+柴朴汤组(D组)、肝郁哮喘+地塞米松组(E组)。肝郁造模阶段：C、D、E组小鼠行28天随机慢性应激刺激(CUMS)，包括24小时禁水，24小时禁食，镊子夹尾180秒，绑带束缚1小时，4℃游泳5分钟，热环境(45℃)，水平震荡和旋转、昼夜颠倒及噪音干扰2小时，居住环境改变(单笼饲养、鼠笼倾斜、潮湿垫料等)，A、B组小鼠正常饲养。哮喘造模阶段：A组用生理盐水腹腔注射，蒸馏水雾化作为实验对照，D组每次雾化前半个小时给予柴朴汤(1.5g/kg)0.3ml/只注胃，E组每次雾化前半个小时给予地塞米松(1mg/kg)0.3ml/只注胃，A、B、C组予以0.3ml/只生理盐水注胃。B、C、D、E组小鼠于第1天、第8天经腹腔注射OVA10ug和Al(OH)3400ug混合液0.2ml/只。第21天时,单独将每只小鼠放在自制雾化箱中，保持密闭，用1%OVA雾化吸入进行激发，连续7天，每日雾化1次，每次持续30分钟。最后一次雾化24h后，麻醉并行腹主动脉放血处死小鼠，取小鼠肺组织行HE染色图像分析；WB测CADM1、IL-6、IL-8在小鼠肺组织中的表达；实时荧光定量PCR测小鼠肺组织CADM1mRNA、IL-6mRNA、IL-8mRNA的相对表达量。 结果:1.HE染色示A组小鼠肺组织气道正常无特殊，未见明显嗜酸性粒细胞及其他炎症细胞浸润；B组小鼠可见支气管管腔出现狭窄，边缘增厚，少许断裂，管腔周围可见炎症细胞浸润，上皮细胞可见增生；C组小鼠肺组织见管腔明显狭窄，边缘不完整，明显增厚，管腔上皮细胞出现明显增生、脱落，周围大量嗜酸性粒细胞浸润；D、E组管腔未见明显增生，管壁基本完整，无明显破坏，周围可见些许炎症细胞。 2.WB结果显示哮喘组及肝郁哮喘组CADM1蛋白相对灰阶值均低于正常对照组(P＜0.05)，柴朴汤组与地塞米松组CADM1蛋白相对灰阶值均高于肝郁哮喘组(P＜0.01)；哮喘组及肝郁哮喘组IL-6蛋白相对灰阶值均高于正常对照组(P＜0.01)，且肝郁哮喘组表达量高于哮喘组(P＜0.05)，柴朴汤组与地塞米松组IL-6蛋白相对灰阶值均低于肝郁哮喘组(P＜0.01)；哮喘组及肝郁哮喘组IL-8蛋白相对灰阶值均高于正常对照组(P＜0.05)，柴朴汤组与地塞米松组IL-8蛋白相对灰阶值均低于肝郁哮喘组(P＜0.05)，柴朴汤组与地塞米松组CADM1、IL-6、IL-8蛋白表达无明显差异(P＞0.05)。肝郁型哮喘组CADM1与IL-6蛋白相关性分析，P=0.939＞0.05，两者无明显相关性；肝郁型哮喘组CADM1与IL-8蛋白相关性分析，P=0.034＜0.05，两者呈正相关。 3.实时荧光定量PCR显示哮喘组及肝郁哮喘组CADM1mRNA的相对表达量均低于正常组(P＜0.01)，且肝郁哮喘组表达量低于哮喘组(P＜0.05)，柴朴汤组与地塞米松组CADM1mRNA的相对表达量均高于肝郁哮喘组(P＜0.01)；哮喘组及肝郁哮喘组IL-6mRNA的相对表达量均高于正常组(P＜0.05)，且肝郁哮喘组表达量高于哮喘组(P＜0.01)，柴朴汤组及地塞米松组IL-6mRNA的相对表达量均低于肝郁哮喘组(P＜0.01)；哮喘组及肝郁哮喘组IL-8mRNA的相对表达量均高于正常组(P＜0.01)，且肝郁哮喘组表达量高于哮喘组(P＜0.01)，柴朴汤组及地塞米松组IL-8mRNA的相对表达量均低于肝郁哮喘组(P＜0.01)。柴朴汤组CADM1mRNA相对表达量高于地塞米松组(P＜0.01)，柴朴汤组IL-6、IL-8mRNA相对表达量低于与地塞米松组(P＜0.05，P＜0.01)。肝郁型哮喘组CADM1mRNA与IL-6mRNA相关性分析，P=0.646＞0.05，两者无明显相关性；肝郁型哮喘组CADM1mRNA与IL-8mRNA相关性分析，P=0.19＞0.05，两者无明显相关性。 结论:1.肝郁型哮喘组小鼠CADM1表达下调，IL-6、IL-8表达上调。 2.柴朴汤可上调CADM1，下调IL-6、IL-8，减轻肝郁型哮喘气道炎症因子浸润，缓解哮喘症状。 收起