摘要: 研究和调控蛋白质-蛋白质相互作用(PPIs)对于探索生命奥秘、调节生理过程以及发展新的疗法都有非常重要的意义。多肽作为分子量介于传统的PPI调控剂——蛋白质及有机小分子之间并兼具二者优势的新型调控剂具有极大的应用潜力。然而多肽的代谢稳定性差、... 展开 研究和调控蛋白质-蛋白质相互作用(PPIs)对于探索生命奥秘、调节生理过程以及发展新的疗法都有非常重要的意义。多肽作为分子量介于传统的PPI调控剂——蛋白质及有机小分子之间并兼具二者优势的新型调控剂具有极大的应用潜力。然而多肽的代谢稳定性差、生物利用率低等缺点限制了其进一步的发展。因此，研究与探索新的理论和方法以提高多肽的生理稳定性和生物利用率将具有重要意义。本工作旨在构建一种普适的、可兼顾多肽生理稳定性和生物活性的多肽-聚合物结合物体系。并借助该体系研究多肽-聚合物结合物与目标蛋白多价相互作用的机理及基于多肽-聚合物结合物的可控折叠体系对多肽活性的可逆调控。并通过癌细胞的存活实验，研究多肽-聚合物结合物调控细胞内PPI和诱导癌细胞凋亡的作用。 本论文分为四章，包括以下内容: 第一章:首先综述了几类PPI调控剂或探针的特点及优缺点;其次对比介绍了几种稳定多肽类PPI调控剂或探针的方法及其研究现状;最后简述了通过“多价配体”的设计理念提高PPI亲和力的机理;在此基础上提出了研究思路、研究内容和意义。 第二章:利用原子转移自由基聚合(ATRP)法，分别将单体2-氨基乙基甲基丙烯酸酯盐酸盐(AEMA)与单体寡聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯(OEGMA475)以及单体AEMA、OEGMA475与2-甲基-2-丙烯酸-2-（2-甲氧基乙氧基）乙酯(MEO2MA)共聚，合成两种不同组成的基于pOEGMA的刷型共聚物poly(AEMA-co-OEGMA475)及poly(AEMA-co-OEGMA475-MEO2MA)。并通过连接剂3-(2-吡啶基二硫基)丙酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SPDP)，将聚合物侧链的部分氨基转化为二硫吡啶，在还原性分子的作用下，二硫吡啶被还原为巯基，并与修饰了含马来酰亚胺基团的连接分子的多肽反应，从而将多肽共价偶联于聚合物的侧链上。 第三章:通过优化聚合物的组成、多肽-聚合物间连接分子的长度、单链聚合物上多肽的修饰数目，构建能够兼顾多肽生理稳定性及生物活性的多价多肽-聚合物结合物体系;在此基础上，表征多价多肽-聚合物结合物与目标蛋白的结合常数、结合相关的热力学参数及多肽-聚合物结合物与目标蛋白多价结合所形成的复合物，进而探究二者的多价相互作用机理;并通过乳癌细胞(MCF7)存活实验，对多肽-聚合物结合物调控细胞内PPIs及诱导MCF7凋亡的作用进行研究。 第四章:构建基于多肽-聚合物结合物的可控折叠体系以实现对多肽活性的可逆调控。在多肽-聚合物的基础上，利用聚合物及多肽上的自由巯基形成动态二硫键使单链多肽-聚合物结合物在氧化/还原条件下可控地折叠/展开，改变多肽所处微环境的位阻，从而达到在不同的条件下对多肽活性的可控调节。 收起