摘要: 植物吸收水分的同时吸收了过多的盐离子，特别是过量的Na+对植物具有毒害作用。盐生植物能在高盐土壤中能够维持生命活动是因为，植物从土壤中吸收的过量的Na+被运送到液泡中，防止细胞质基质中高浓度的盐离子的对植物细胞产生的毒害作用，在这个转运... 展开 植物吸收水分的同时吸收了过多的盐离子，特别是过量的Na+对植物具有毒害作用。盐生植物能在高盐土壤中能够维持生命活动是因为，植物从土壤中吸收的过量的Na+被运送到液泡中，防止细胞质基质中高浓度的盐离子的对植物细胞产生的毒害作用，在这个转运的过程中，液泡膜Na+/H+反向转运载体(NHX)蛋白为运输蛋白起着重很要的作用。NHX基因是赋予植物耐盐性的主要基因之一。大量研究证明，当过量表达NHX基因可以提高植物的耐盐性，从而提高植物对盐胁迫的抗性。 骆驼刺具有抗寒、抗旱、耐盐和抗风沙的特性，是一种非常好的生物性抗逆研究材料。 本研究以0mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、200mmol/L等四个浓度的NaCl溶液对盆栽的骆驼刺幼苗进行盐胁迫，测定叶片、茎、主根、须根中MDA、SOD、POD、CAT和Pro等生理生化指标的含量及活性，确定它们与骆驼刺高耐盐性之间的关系。结果表明，盐胁迫，尤其是高浓度盐胁迫(100 mmol/L和200 mmol/L)对骆驼刺主根和叶片中SOD活性的促进作用更明显，还伴随着POD活性在各器官中显著诱导上升，说明POD在抵御氧化胁迫中起主要作用。实验结果表明盐胁迫下骆驼刺中SOD、POD和CAT活性的上调可能就是其具有较强盐抗性的原因之一。 通过比较CTAB法、热硼酸法和Trizol法来提取骆驼刺叶片总RNA的效果，确定了Trizol法作为骆驼刺叶片总RNA提取的方法，设计引物，反转录合成cDNA第一链，PCR扩增得到一条600-800bp的DNA条带，与报道的AspNHX1基因的核心序列基本相符与Pmd19-T载体连接转化到DH5a感受态细胞中筛选阳性克隆，并对阳性克隆测序后，经3'-RACE扩增的DNA片段并连接到载体上进行测序。测序结果显示cDNA核心片段长度为1484bp，编码470个氨基酸，通过Blast软件与NCBI中已注册的NHX序列比较，其cDNA序列与猪毛菜SaNHX1(Salsola affinis)、梭梭HaNHX1(Haloxylon ammodendron)、盐爪爪Kf NHX1(Kalidium foliatum)的核苷酸序列同源性高达96％、89％、89％，氨基酸序列同源性达到97％、93％和90％。 收起