摘要: 随着人口增长,经济发展,微藻成为最具潜力的食品和生物能源原料。本文主要分析斜生栅藻和舟形藻的脂肪酸组成及含量,研究两种微藻的基因工程选择标记,从而为通过基因工程手段培育优良藻种奠定基础。 我们通过GC-MS测了两种藻中的脂肪酸组成和含量。... 展开 随着人口增长,经济发展,微藻成为最具潜力的食品和生物能源原料。本文主要分析斜生栅藻和舟形藻的脂肪酸组成及含量,研究两种微藻的基因工程选择标记,从而为通过基因工程手段培育优良藻种奠定基础。 我们通过GC-MS测了两种藻中的脂肪酸组成和含量。斜生栅藻中检测到的饱和脂肪酸主要为14:0、16:0和18:0,其百分含量分别为5.24％、21.94％、1.94％；单不饱和脂肪酸主要为16:1和18:1,其百分含量分别为44.08％、6.99％；多不和脂肪酸为20:5(EPA),其百分含量为19.81％。其中16:0、16:1和EPA含量较高。舟形藻中饱和脂肪酸14:0、16:0的百分含量分别为0.38％、64.13％,多不饱和脂肪酸16:3和20:5的百分含量分别为15.87％、19.62％,其中16:0脂肪酸含量最高,16:3和EPA两种多不饱和脂肪酸含量也较高。 为了筛选到斜生栅藻基因工程选择标记,我们研究了斜生栅藻对八种常用试剂:氨苄青霉素、卡那霉素、庆大霉素、潮霉素、链霉素、草胺膦(phosphinothricin PPT)、G418和氯霉素的敏感性。结果显示,斜生栅藻对氨苄青霉素、卡那霉素及PFT均不敏感；对较高浓度(500μg/mL)的庆大霉素和潮霉素比较敏感；对链霉素、氯霉素及中(300μg/mL)、高浓度(500μg/mL)的G418非常敏感。通过计算斜生栅藻在各种试剂不同浓度影响下的比生长速度,发现链霉素、氯霉素及中、高浓度的G418能够很好地抑制斜生栅藻的生长。这一结果为筛选出斜生栅藻基因工程选择试剂,建立其遗传转化体系奠定了基础。 为了筛选到舟形藻的基因工程选择标记,我们同样选用上述七种常用抗生素及植物遗传转化中常用到的PPT,来初步研究舟形藻对它们的敏感性。结果显示,舟形藻对卡那霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、链霉素及PPT都不敏感；对较高浓度(500μg/mL)的潮霉素比较敏感；对中(300μg/mL)、高浓度(500μg/mL)的G418及氯霉素非常敏感。G418和氯霉素在高等植物和藻类转化中均有成功的例子,而且所用剂量也不大,所以它们都有可能发展成为舟形藻基因工程中的理想筛选抗生素,它们所对应的选择标记基因新霉素磷酸转移酶基因(nptⅡ)和氯霉素乙酰转移酶基因(cat)则有望成为其基因工程选择标记。 收起