摘要: 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)是全世界三大养殖对虾中单位产量最高的虾种。N—乙酰—β—D—氨基葡萄糖苷酶(N—Acetyl—β—D—glucosaminidase，简称NAGase，EC．3.2.1.52)在对虾的蜕壳发育和营养代谢中发挥着重要作用。因此，研究凡纳滨对虾在患病过程的... 展开 凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)是全世界三大养殖对虾中单位产量最高的虾种。N—乙酰—β—D—氨基葡萄糖苷酶(N—Acetyl—β—D—glucosaminidase，简称NAGase，EC．3.2.1.52)在对虾的蜕壳发育和营养代谢中发挥着重要作用。因此，研究凡纳滨对虾在患病过程的酶学变化，探讨环境污染物、饲料添加剂、水产养殖常用药物等对NAGase活力的影响与调控，以及对虾活体急毒性试验的开展，探究重金属离子对凡纳滨对虾NAGuse活力的影响，将有利于对虾养殖业发展，为对虾养殖水环境污染监测提供更加充分、直观的科学依据，并填补国内外在这方面的研究空白。本文以凡纳滨对虾壳膜与内脏所提NAGase为对象，展开以下几方面的研究。 (1)跟踪考察分析健康和患红体病的凡纳滨对虾壳膜与内脏NAGase的活力和性质的差异。测得健康对虾壳膜NAGase的活力为34.80 U/mg，内脏NAGase的活力为35.34U/mg；而患红体病对虾壳膜NAGase的活力为38.32 U/mg，内脏NAGase的活力为20.02 U/mg。结果表明：两种来源对虾的NAGase活力、基本酶学性质等均存在差异。对虾患红体病后，壳膜与内脏NAGase的催化反应动力学常数Km和Vm值、活化能均较高，但其最适温度较低，pH稳定性及热稳定性较差。同时，对虾患病前后，壳膜与内脏来源的NAGase对外界各影响因子(Hg2+、Zn2+、Cu2+、Cd2+、Pb2+、Al3+等重金属离子污染物；乙醇、甲醛、苯酚、甲醇、二氧六环、DMF、DMSO等有机污染；脲、NBS、SDS等常用化学修饰剂及变性剂)的敏感性也发生了变化。 (2)养殖水体常用消毒药物中，次氯酸钠、三氯异氰尿酸、季氨盐对凡纳滨对虾壳膜与内脏来源的NAGase的活力有不同程度的影响。同时，次氯酸钠、三氯异氰尿酸对两种来源的酶的抑制为不可逆过程。青霉素钾、链霉素、庆大霉素、卡那霉素等对壳膜与内脏来源的NAGas活力基本上没有影响；养殖常用的内服、外用抗菌药物中，盐酸环丙沙星对两种来源的酶有激活作用，而诺氟沙星和磺胺甲噁唑对酶活力则有不同程度的抑制作用。磺胺甲噁唑对壳膜NAGase表现为混合型可逆抑制，对内脏来源的NAGase表现为非竞争性抑制；诺氟沙星对内脏来源的NAGase为混合型可逆抑制。考察几种养殖常用维生素对内脏NAGase活力的影响，其中VB12、烟酸、核黄素等对酶活力基本上没有影响；而VB1、VB6、抗坏血酸等对该酶活力均有不同程度的抑制作用，进一步研究了VB6的抑制作用动力学，其对酶的抑制作用为非竞争性可逆抑制。 (3)对凡纳滨对虾进行养殖试验，研究重金属离子对对虾NAGase活力影响，在不同时间取样并考察Cu2+、．Zn2+、Cd2+、Pb2+、Hg2+等重金属离子对凡纳滨对虾壳膜及内脏NAGase活力的影响。结果显示5种重金属离子低浓度组在短时间内对凡纳滨对虾壳膜与内脏的NAGase活力没有显著影响，48h后随作用时间的延长，重金属离子使两种来源的NAGase活力均逐渐降低，表现为显著性抑制的剂量效应关系。 收起