摘要: 目的： 分析三个具有常染色体显性遗传特点的先天性白内障家系：CA-001家系、CA-002家系、CA-003家系的临床表型特征，研究常染色体显性遗传先天性白内障的分子发病机制，寻找致病基因及其突变，明确基因型与表型的关系。 方法： 1.对家系进... 展开 目的： 分析三个具有常染色体显性遗传特点的先天性白内障家系：CA-001家系、CA-002家系、CA-003家系的临床表型特征，研究常染色体显性遗传先天性白内障的分子发病机制，寻找致病基因及其突变，明确基因型与表型的关系。 方法： 1.对家系进行详细的临床检查(包括询问病史、视力、裂隙灯、直接眼底镜)，排除其他疾患，确定临床表型。 2.利用连锁分析进行排除定位提取三个家系成员外周血DNA，选取分布在晶体蛋白基因CRYAA、CRYAB、CRYBB1、CRYBB2、CRYBA1、CRYGC、CRYGD；缝隙连接蛋白基因GJA3(CX46)GJA8(CX50)；膜蛋白基因MIP；在眼前节发育中起调节作用的基因PITX3、MAF、HSF4；编码串珠状纤维结构蛋白-2基因BFSP2上下2厘摩范围内的微卫星标记物，利用聚合酶链反应(PCR)扩增微卫星标记物，并利用ABI3130-avant全自动遗传分析仪读取微卫星标记物的等位基因片段大小，用ABIPrismGeneScanSoftware3.7软件进行分子量内标的检测和扩增片段大小分析。使用ABIPrismGenotyperSoftware3.7软件系统读取等位基因片段大小，进行基因分型。利用MILINK软件，采用两点法，计算最大优势对数(LODScore)值，进行排除定位，确定候选基因。 3.基因序列分析据连锁分析结果，确定候选基因。用ABI3130-avant全自动遗传分析仪，对CA-001家系进行CRYAB、CRYGC、CRYGD基因测序，对CA-002家系进行CRYBB2基因测序，对CA-003家系进行CRYAB基因测序，以确定家系致病基因。 结果： 1.CA-001家系家系表型为特殊的珊瑚状白内障。连锁分析结果显示当θ=0.00时，在D2S325得到最高LOD值为1.51，当0=0.00时，在D11S925得到LOD值1.20，支持其与该家系先天性白内障疾病相关候选基因有连锁关系；CRYGC/D定位于2q33-q35，CRYAB定位于11q22-q22.3。CRYGD、CRYGC、CRYAB基因可能为该先天性白内障疾病相关候选基因。测序结果显示该家系患者CRYGD基因第二外显子第70位碱基由C突变为A，导致第23位的脯氨酸变成了苏氨酸(P23T)，且这一错意突变与疾病表型完全共分离。对该先天性白内障家系成员直接测序筛查CRYGC基因、CRYAB基因，编码区未发现突变。 2.CA-002家系家系表型为多态型，双眼晶状体皮质不均匀混浊，呈白色，2名患者伴眼球水平震颤。连锁分析结果显示当0=0.00时，在D22S315得到最高LOD值为1.20。CRYBB2位于22q11.2，连锁分析支持CRYBB2基因为该先天性白内障疾病相关候选基因。对该先天性白内障家系成员直接测序筛查CRYBB2基因，编码区未发现突变。 3.CA-003家系家系表型为多态型，双眼晶状体皮质不均匀混浊或核混浊，呈白色，伴有小角膜和内斜。连锁分析结果显示当θ=0.00时，在D3S1569得到最高LOD值为0.96，当θ=0.00时，在D1S2842、D11S898、D21S266、22S539均得到LOD值0.60。其余LOD值为负值或0。对该先天性白内障家系成员直接测序筛查CRYAB基因，编码区未发现突变。 结论： 1.CA-001家系、CA-002家系、CA-003家系属于常染色体显性遗传先天性白内障家系。 2.CA-001家系的致病基因为CRYGD基因，该家系患者CRYGD基因第二外显子第70位碱基由C突变为A，导致第23位的脯氨酸变成了苏氨酸(P23T)，γD-晶状体蛋白P23T突变可能是导致该家系白内障发病的主要原因。 3.CA-002家系，初步排除了CRYBB2基因与该家族先天性白内障的相关性。对该家系的基因定位需要更进一步的全基因组扫描，以发现致病基因在染色体上的可疑区间。 4.CA-003家系，初步排除了CRYAB基因与该家族先天性白内障的相关性。对该家系的基因定位需要更进一步的全基因组扫描，以发现致病基因在染色体上的可疑区间。 收起