摘要: 目的: 以橄榄总黄酮(按芦丁折算)提取物为有效成分，筛选出最佳提取条件，用大孔树脂法对橄榄总黄酮进行纯化，确定最佳纯化条件。采用大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型，研究TFCO对局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)的保护... 展开 目的: 以橄榄总黄酮(按芦丁折算)提取物为有效成分，筛选出最佳提取条件，用大孔树脂法对橄榄总黄酮进行纯化，确定最佳纯化条件。采用大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型，研究TFCO对局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)的保护作用，并探讨其机制。 方法: (1)以橄榄总黄酮(按芦丁折算)提取物为有效成分，采用可见分光光度法，对TFCO的含量进行控制，采用乙醇作为溶剂对不同浓度、不同用量、不同提取时间3个因素按正交实验法设计优选出最佳提取工艺。用大孔树脂法对。TFCO进行纯化，筛选了大孔树脂的种类，综合考察了树脂的吸附率，解析率，上样流速，上样液pH，洗脱剂浓度，洗脱体积，流速等各项指标。 (2)线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞2h/再灌注24h模型，于再灌注前4天灌胃给予橄榄总黄酮30、60 mg.kg-1。神经病学评分观察神经功能缺失症状；TTC染色法观察脑梗死体积；AutoCAD图像分析软件计算脑水肿程度；光镜观察脑组织形态学变化；免疫组化法检测脑组织iNOS、TNF-α表达；生化法检测脑组织中MPO、GSH活性及T-AOC含量。 结果: (1)超声提取的最佳工艺是：取橄榄适量，加4倍量95％乙醇，超声提取60分钟； (2)纯化的最佳工艺是：使用D101型大孔树脂，配制pH4.5吸附液以2BV/h上柱，至泄漏。用3BV纯水以2BV/h洗柱后，再用3BV 60％乙醇洗脱，流速为1BV/h，将洗脱液减压浓缩，干燥得橄榄总黄酮，纯度为90.1％。 (3)脑缺血2h/再灌注24h后，神经功能缺失，脑组织出现白色梗死灶，脑水肿明显，形态学呈病理改变，脑组织iNOS、TNF-α蛋白表达增强，MPO活性增高，GSH活性降低，T-AOC含量降低； (4)TFCO 30、60 mg.kg-1均能改善神经功能缺失症状，有效减小脑梗死灶，减轻脑水肿，抑制脑组织iNOS蛋白表达，增高脑组织GSH活性，提高T-AOC含量，还可缓解MPO升高，并能减轻脑组织病理变化，抑制脑组织TNF-α蛋白表达。 结论: (1)大孔吸附树脂纯化橄榄总黄酮，使其纯度达到90％以上； (2)再灌注前4天分别给予TFC030、60mg.kg-1，减轻脑损伤； (3)TFCO对CIRI的保护作用，可能与减少iNOS和TNF-α蛋白表达、抗炎、抗脂质过氧化有关。 收起