摘要: 志贺菌引起的疾病也称为细菌性痢疾，是一种严重的急性肠道传染病。世界各地均有发生，发展中国家发病率明显高于发达国家。不同国家和地区的流行株存在差异。我国人群感染的志贺菌菌株以福氏志贺菌、宋内志贺菌多见。由于细菌性痢疾易传播且危害性强... 展开 志贺菌引起的疾病也称为细菌性痢疾，是一种严重的急性肠道传染病。世界各地均有发生，发展中国家发病率明显高于发达国家。不同国家和地区的流行株存在差异。我国人群感染的志贺菌菌株以福氏志贺菌、宋内志贺菌多见。由于细菌性痢疾易传播且危害性强，因而是消化道传染病研究、预防和治疗的重点之一。开展对志贺菌的遗传机制和致病机理的研究，对更好的防治疾病发生、研制疫苗以及研制新药等均具有重要价值。 志贺菌致病的分子机制十分复杂，目前仍未完全清楚。但志贺菌毒力因子被认为在志贺菌致病过程中起重要作用。其中黏附力、侵袭力、肠毒素、调控因子等是志贺菌主要的毒力因子。 目的：调查兰州市区腹泻患者中志贺菌的感染率和感染型别；确定兰州市区分离志贺菌株的毒力基因型；测定不同毒力基因型志贺菌的毒力，以探讨毒力与毒力基因型的关系。 方法：选择兰州市区三家三甲医院门、急诊急性腹泻患者，采用分离培养、生化反应和血清学鉴别确定兰州市区腹泻患者中志贺菌的感染率和感染型别；设计引物，应用聚合酶链反应(PCR)方法，检测志贺菌肠毒素1基因(setlA和setlB)、志贺菌肠毒素2基因(sen)、侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)、侵袭相关位点基因(ial)以及多重调控基因virA，确定兰州市区分离志贺菌株的毒力基因型；以腹腔注射为感染途径，测定不同毒力基因型的志贺菌对昆明种小鼠的半数致死量(LD50)。 结果： 1.从80例急性腹泻患者粪便中分离出志贺菌16株，阳性率为20.0％。其中福氏志贺菌9株，占56.2％，宋内志贺菌6株，占37.5％，痢疾志贺菌1株，占6.2％。同一菌群的不同志贺菌间在生化反应和抗原性方面存在差异。 2.兰州市区的志贺菌毒力基因virA、set1A阳性率最高，为100％； ipaH次之，阳性率为93.7％；ial、Sen阳性率分别为56.2％、62.5％；set1B阳性率最低，仅为25.0％。除virA、ipaH、set1A外，宋内志贺菌sen阳性率较高，为50.0％；ial检出率较低，为33.3％，6株宋内志贺菌均未检出setlB。福氏志贺菌ial、setlB、sen阳性率分别为66.7％、44.4％、66.7％均高于宋内志贺菌。 3.7株不同毒力基因型(virA+ipaH+setlA,virA+ial+ipaH+setlA+setlB+sen,virA+setlA,virA+ial+ipaH+setlA+sen，virA+ipaH+setlA+sen，virA+ipaH+setlA+setlB，virA+ial+ipaH+setlA+setlB)志贺菌LD50测定的结果分别为：1.422x109cfu/ml、6.653×107 cfu/ml、阴性、6.653×108 cfu/ml、1.422×109 cfu/ml、1.422×109cfu/ml、6.653×108cfu/ml；对照宋内志贺菌51334的LD50为3.062×109 cfu/ml。 结论： 1.兰州市区腹泻患者中志贺菌的感染率为20.0％左右，感染菌群以福氏志贺菌为主，其次为宋内志贺菌。宋内志贺菌感染的比例相对较高，占37.5％。 2.兰州市区志贺菌中存在virA、ial、ipaH、setlA、setlB、sen毒力基因，以virA，setlA，ipaH较稳定。志贺菌相关毒力基因检测中，福氏志贺菌检出率高于宋内志贺菌。宋内志贺菌携带setlA。 3兰州市区志贺菌的毒力与毒力基因型密切相关，以virA、ial、ipaH、setlA、setlB和sen均阳性的福氏志贺菌Ⅳ型毒力最强。 4.virA，setlA，ipaH基因可作为靶基因用于兰州市区志贺菌的检验。setlB可用于筛选福氏志贺菌Ⅳ型菌株。 收起