摘要: 目的：通过经脑室移植人神经干细胞(human neural stemcells，hNSCs)配合高压氧(hyperbaric oxygenation，HBO)治疗，观察HBO对植入的hNSCs存活、迁移、分化的影响。 方法：利用7日龄(d7)Wistar大鼠采用Rice法复制HIBD模型，并随机分为HIBD组(n=20... 展开 目的：通过经脑室移植人神经干细胞(human neural stemcells，hNSCs)配合高压氧(hyperbaric oxygenation，HBO)治疗，观察HBO对植入的hNSCs存活、迁移、分化的影响。 方法：利用7日龄(d7)Wistar大鼠采用Rice法复制HIBD模型，并随机分为HIBD组(n=20)、移植组(n=24)、HBO组(n=20)和移植+HBO组(n=24)。利用体外培养的方法制备hNSCs单细胞悬液，d10时采用侧脑室微量注射法进行hNSCs移植，于移植后15分钟内开始HBO治疗，每日1次，连续10d。于d11，d12，d13，d20时利用原位缺口末端染色法(TUNEL法)进行皮质和海马区凋亡细胞计数。d20行病理检查，并应用免疫荧光组化染色法检测移植组和移植+HBO组植入细胞存活、迁移、分化情况。 结果： 1．胎儿脑组织体外培养12天可获得hNSCs球，免疫荧光标记显示为Nestin阳性细胞，经诱导分化后NF、GFAP染色呈阳性，提示其具有NSCs特性。 2．TUNEL阳性细胞计数：d11时各组大鼠脑组织皮层和海马区均可检测到凋亡细胞，与HIBD组比较，HBO组TUNEL阳性细胞数的差异不具有显著性，而移植组和移植+HBO组的TUNEL阳性细胞减少，差异具有显著性(均P(0.01)；移植组和移植+HBO组两组间比较差异也具有显著性(P<0.01)。d20时，与HIBD组比较，HBO组、移植组和移植+HBO组的TUNEL阳性细胞减少，差异均具有显著性(均P(0.01)，移植组和移植+HBO组两组间比较差异也具有显著性(P<0.01)。3.d20时免疫荧光染色结果显示植入细胞从侧脑室向周围脑实质广泛迁移，分布在脑室旁、脑白质通路、丘脑、皮层及海马等处，在迁移方式与分布上，移植组和移植+HBO组无明显差异，但移植+HBO组植入细胞的存活数量高于移植组，其差异具有显著性(P(0.01)；两组均可检测到hNSCs分化形成的神经元和星形胶质细胞和未分化的hNSCs，细胞形态与宿主细胞相似。 结论： (1)来源于人的胎脑NSCs移植至HIBD新生鼠脑后，植入细胞能存活、迁移并可分化为神经元及星型胶质细胞。 (2)hNSCs移植对HIBD大鼠受损脑组织有保护和修复作用。 (3)HBO治疗可通过促进植入细胞的存活、迁移和分化而增强NSCs移植的上述保护作用。 收起