摘要 : 目的 建立快速检测猴痘病毒(monkeypox virus,MPXV)的胶体金免疫层析检测方法,并对该方法进行验证.方法 采用NaCl沉淀实验优化7株抗MPXV A35R单克隆抗体(单抗)的标记条件,采用抗体配对实验确定金标抗体与捕获抗体,并优化抗体检测线(T线)及质控线(C线)... 展开 目的 建立快速检测猴痘病毒(monkeypox virus,MPXV)的胶体金免疫层析检测方法,并对该方法进行验证.方法 采用NaCl沉淀实验优化7株抗MPXV A35R单克隆抗体(单抗)的标记条件,采用抗体配对实验确定金标抗体与捕获抗体,并优化抗体检测线(T线)及质控线(C线)的点样浓度,建立胶体金免疫层析检测方法.对该方法的特异性、检测限、稳定性、重复性、钩状效应和抗干扰性进行检测.结果 7株抗MPXV A35R单抗8D7、10D2、2F5、10G4、7G5、10E4、2D7的最适抗体标记量分别为0.96、0.48、0.96、0.96 0.96、0.96、0.48 μl,金标抗体2D7和检测抗体8D7组合为最佳配对抗体;T线和C线点样的最佳浓度分别为1.00和0.50 mg/ml.胶体金试纸条可检测出MPXV,而检测不出其他病毒;MPXV A35R蛋白和灭活MPXV溶液的最低检测限度分别为2.34 × 10-5 mg/ml和1.00×105 TCID50/ml;阴性样本和阳性样本的显色情况一致;20份试纸条检测样本的显色情况一致;检测MPXVA35R蛋白和灭活MPXV溶液的浓度与显色程度成正比;试纸条不受干扰物的干扰.结论 成功建立了快速检测MPXV的胶体金免疫层析检测方法,该方法具有良好的特异性、检测范围、稳定性、重复性和抗干扰性,且不存在钩状效应. 收起