摘要 : 目的:观察温针灸对早期膝骨关节炎(KOA)模型大鼠软骨细胞凋亡及miR-27a介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。方法:采用随机数字表法将50只SD大鼠分为对照组、模型组、温针灸组、抑制剂组及抑制剂+温针灸组(简称联合组),每组10只大鼠。于造模前3 d对抑... 展开 目的:观察温针灸对早期膝骨关节炎(KOA)模型大鼠软骨细胞凋亡及miR-27a介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。方法:采用随机数字表法将50只SD大鼠分为对照组、模型组、温针灸组、抑制剂组及抑制剂+温针灸组(简称联合组),每组10只大鼠。于造模前3 d对抑制剂组及联合组大鼠给予局部miR-27a抑制剂药物干预;除对照组以外,其余各组大鼠均通过局部注射木瓜蛋白酶方法制成早期KOA大鼠模型。待造模完成后,联合组及温针灸组大鼠均给予内、外侧膝眼穴温针灸治疗,每次治疗30 min,共治疗14 d。模型组及抑制剂组大鼠则同期在固定器上制动30 min。于干预2周后采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠软骨组织病理学改变,采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡情况,采用ELISA法检测软骨组织白介素(IL)-1β和IL-6水平;采用WB技术检测软骨组织p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、PI3K、AKT、mTOR、LC3-Ⅱ及Beclin1蛋白表达,采用qRT-PCR技术检测软骨组织中miR-27a含量。结果:干预结束后发现温针灸组软骨细胞形态较模型组明显改善,抑制剂组及联合组软骨细胞形态较温针灸组进一步改善;温针灸组软骨细胞凋亡率明显低于模型组( P<0.05);与温针灸组比较,抑制剂组及联合组软骨细胞凋亡率均显著降低( P<0.05),抑制剂组与联合组软骨细胞凋亡率组间差异无统计学意义( P>0.05);温针灸组、抑制剂组和联合组IL-1β、IL-6、LC3-Ⅱ、Beclin1、miR-27a蛋白表达及mRNA水平均较模型组明显降低( P<0.05),抑制剂组及联合组上述指标均较温针灸组显著降低( P<0.05);温针灸组、抑制剂组和联合组p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT及p-mTOR/mTOR水平均较模型组明显升高( P<0.05),抑制剂组及联合组上述指标水平亦显著高于温针灸组( P<0.05),抑制剂组及联合组上述蛋白表达及mRNA水平组间差异均无统计学意义( P>0.05)。 结论:温针灸可能通过下调miR-27a表达,促进PI3K/AKT/mTOR信号通路激活,能抑制早期KOA模型大鼠软骨细胞过度自噬及凋亡,有助于减轻关节炎症反应及损伤,延缓关节退变进程。 收起