摘要 : 目的 探讨黄芪皂苷Ⅱ(AsⅡ)对肾透明细胞癌786-O细胞增殖的影响及潜在机制.方法 噻唑兰(MTT)法和克隆实验检测AsⅡ对786-O细胞的生长和集落形成的抑制作用.细胞流式术检测ASⅡ的凋亡诱导作用.随后,用免疫印迹法检测不同处理组细胞PI3K-AKT-mTOR通路蛋... 展开 目的 探讨黄芪皂苷Ⅱ(AsⅡ)对肾透明细胞癌786-O细胞增殖的影响及潜在机制.方法 噻唑兰(MTT)法和克隆实验检测AsⅡ对786-O细胞的生长和集落形成的抑制作用.细胞流式术检测ASⅡ的凋亡诱导作用.随后,用免疫印迹法检测不同处理组细胞PI3K-AKT-mTOR通路蛋白及凋亡执行蛋白的变化,最后利用PI3K-AKT-mTOR通路激活剂IGF-1与AsⅡ对细胞共处理后,流式细胞术检测细胞凋亡水平的变化,进一步验证PI3K-AKT-mTOR通路在凋亡诱导中的作用.结果 AsⅡ对786-O细胞的增殖抑制效应具有浓度和时间依赖性,时间与浓度之间有交互作用(F时间=513.00,P<0.001;F浓度=1678.00,P<0.001;F时间×浓度=18.23,P<0.001),并可抑制细胞集落形成.AsⅡ可诱导细胞凋亡并诱导凋亡执行蛋白cleved caspase-3的表达(P0μmol/L AsⅡ组vs 10μmol/L AsⅡ组=0.0139,P0μmol/L AsⅡ组vs 20μmol/L AsⅡ组<0.001).AsⅡ可抑制PI3K、AKT、mTOR蛋白的磷酸化(p-PI3K:P0μmol/L AsⅡ组vs 20μmol/L AsⅡ组=0.0324;p-mTOR:P0μmol/L AsⅡ组vs 10μmol/L AsⅡ组=0.0041,P0μmol/L AsⅡ组vs 20μmol/L AsⅡ组<0.001;p-AKT:P0μmol/L AsⅡ组vs 10μmol/L AsⅡ组=0.0032,P0μmol/L AsⅡ组vs 20μmol/L AsⅡ组=0.0012).IGF-1可以逆转AsⅡ对AKT的磷酸化(P=0.0068),并减弱AsⅡ对786-O细胞的凋亡诱导效应.结论 AsⅡ可抑制肾癌780-O细胞的增殖和集落形成,并通过抑制PI3K-AKT-mTOR信号通路的磷酸化,上调cleved caspase-3的表达,进而诱导细胞凋亡. 收起